Τομέας Βασικών Επιστημών
Βιβλιοθήκη Επιστημών Υγείας

2013-03-29

2013

Μαρκάκης Κωνσταντίνος

Αναπληρώτρια Καθηγήτρια Ε. Κοτσιφάκη (επιβλέπουσα), Εργαστήριο Πειραματικής Φυσιολογίας, Ιατρική Σχολή Πανεπιστημίου Αθηνών, Καθηγητής Κ. Δημόπουλος, Εργαστήριο Βιοχημείας, Τμήμα Χημείας Πανεπιστημίου Αθηνών, Επίκουρη Καθηγήτρια Σ. Γραμμένου – Σαββόγλου, Τμήμα Παθολογικής Φυσιολογίας, Ιατρική Σχολή Πανεπιστημίου Αθηνών

Διερεύνηση του ρόλου της συνδεδεμένης με τις λιποπρωτεΐνες φωσφολιπάσης Α2 (Lp-PLA2) στην πρόσληψη της οξειδωμένης LDL από τα μακροφάγα

Ελληνικά

Investigation of the role of lipoprotein associated phospholipase A2 (Lp-PLA2) in the uptake of oxidized LDL by macrophages

Η αναγνώριση και η πρόσληψη της oxLDL από τους εκκαθαριστές υποδοχείς των
μακροφάγων και ο σχηματισμός των αφρωδών κυττάρων μεσολαβούνται από την
οξειδωτικά τροποποιημένη απολιποπρωτεΐνη Β (apoΒ) αλλά και την λιπιδική ομάδα
της oxLDL. Μία σημαντική ποσότητα οξειδωμένης φωσφατιδυλοχολίνης της oxLDL
υδρολύεται στην sn-2 θέση σε λυσοφωφατιδυλοχολίνη και μικρά προϊόντα υδρόλυσης
από την Lp-PLA2, η δραστικότητα της οποίας παρουσιάζει προοδευτική μείωση κατά
τη διάρκεια της οξείδωσης. Η δραστικότητα της Lp-PLA2 μετά από 6 h οξείδωσης με
5μM CuSO4 μειώνεται σε ~40–50%, ενώ μετά από 24 h μόνο 10–15% της αρχικής
δραστικότητας έχει διατηρηθεί.
Ο ρόλος της Lp-PLA2 στη σύνδεση και στην πρόσληψη της oxLDL στα μακροφάγα
εξετάστηκε χρησιμοποιώντας LDL με ακέραιη ή ανεσταλμένη, μετά από επώαση με
αναστολέα, την Lp-PLA2 δραστικότητα. Επιπρόσθετα, LDL οξειδωμένη για 6 h
(μέτρια οξειδωμένη LDL, moderately oxidized LDL, MoxLDL) ή 24 h (ισχυρά
οξειδωμένη LDL, heavily oxidized LDL, HoxLDL) χρησιμοποιήθηκε για να ελεγχθεί η
πιθανή διαφορά μεταξύ ενός βραχύτερου διαστήματος οξείδωσης με παρόν το
μεγαλύτερο μέρος της δραστικότητας της Lp-PLA2 και ενός μεγαλύτερου
διαστήματος κατά τη διάρκεια του οποίου σημαντικό μέρος της δραστικότητας της
Lp-PLA2 έχει απωλεσθεί.
Η σύνδεση και η πρόσληψη των oxLDL εκτιμήθηκε με επώαση με περιτοναϊκά
μακροφάγα ποντικού στους 40C ή 370C αντίστοιχα. Η αναστολή της Lp-PLA2 οδήγησε
σε αύξηση της σύνδεσης και της πρόσληψης κατά ~30% όσον αφορά στις MoxLDL και
κατά ~20% όσον αφορά στις HoxLDL.
Η πιθανή εμπλοκή της ApoB στο παραπάνω αποτέλεσμα εκτιμήθηκε εξετάζοντας τη
σύνδεση και την πρόσληψη ApoB-πρωτεϊνολιποσωμάτων που περιείχαν ApoB
απομονωμένη από oxLDL. Η αναστολή της δραστικότητας της Lp-PLA2 δεν είχε
επίδραση στη σύνδεση ή στην πρόσληψη των ApoB-πρωτεϊνολιποσωμάτων που
παρασκευάστηκαν από ApoB απομονωμένη από MoxLDL ή HoxLDL.
Ο ρόλος της Lp-PLA2 στη σύνδεση και στην πρόσληψη της oxLDL μέσω της λιπιδικής
ομάδας εξετάστηκε με χρησιμοποίηση λιποσωμάτων παρασκευασμένων από τα λιπίδια
που εκχυλίστηκαν από τις oxLDL. Η σύνδεση και η πρόσληψη αυτών των λιποσωμάτων
επέδειξαν όμοιο πρότυπο με αυτό των αντίστοιχων λιποπρωτεϊνών. Η αναστολή της
Lp-PLA2 δραστικότητας οδήγησε σε αύξηση κατά ~ 40% της σύνδεσης και της
πρόσληψης όσον αφορά στα λιποσώματα από MoxLDL λιπίδια και κατά ~ 30% όσον
αφορά στα λιποσώματα από HoxLDL λιπίδια. Η εξέταση της ικανότητας σύνδεσης και
πρόσληψης μίας σειράς φωσφολιπιδίων, των οξειδωμένων και των λυσο παραγώγων
τους ανέδειξε την οξειδωμένη 1-παλμιτόϋλο-2-αραχιδονόϋλο-sn-γλυκερο-
3-φωσφοχολίνη (oxPAPC) να αποτελεί ιδιαίτερα ισχυρό συνδέτη για τους υποδοχείς
των μακροφάγων.
Τα αποτελέσματα της μελέτης αυτής υποστηρίζουν το συμπέρασμα ότι η προοδευτική
αναστολή της δραστικότητας της Lp-PLA2 κατά τη διάρκεια της οξείδωσης οδηγεί σε
αυξημένη αναγνώριση της oxLDL από τους υποδοχείς των μακροφάγων και αυτό κυρίως
αποδίδεται στην αυξημένη αναγνώριση της εμπλουτισμένης σε οξειδωμένα
φωσφολιπίδια, ιδαίτερα σε oxPAPC, λιπιδικής ομάδας της oxLDL.

Συνδεδεμένη με λιποπρωτεΐνες φωσφολιπάση Α2, Οξειδωμένη LDL, Μακροφάγο , Απολιποπρωτεΐνη Β100, 1-παλμιτόϋλο-2-αραχιδονόϋλο-sn-γλύκερο-3-φωσφοχολίνη

Όχι

0

Ναι

591

300

https://pergamos.lib.uoa.gr/uoa/dl/object/1306077/file.pdf

https://pergamos.lib.uoa.gr/uoa/dl/object/1306077