Λεπτομερής ενζυμικός χαρακτηρισμός μιας νέας ανθρώπινης ριβονουκλεάσης

Διδακτορική Διατριβή uoadl:1308997 281 Αναγνώσεις

Μονάδα:
Τομέας Βιοχημείας Μοριακής Βιολογίας
Βιβλιοθήκη Σχολής Θετικών Επιστημών
Ημερομηνία κατάθεσης:
2013-02-04
Έτος εκπόνησης:
2013
Συγγραφέας:
Κυρίτση Μαριάννα
Στοιχεία επταμελούς επιτροπής:
Σίδερης Διαμάντης Αναπλ. Καθηγ.(Επιβλέπων), Φραγκούλης Εμμανουήλ Καθηγ., Βοργιάς Κωνσταντίνος Καθηγ.
Πρωτότυπος Τίτλος:
Λεπτομερής ενζυμικός χαρακτηρισμός μιας νέας ανθρώπινης ριβονουκλεάσης
Γλώσσες διατριβής:
Ελληνικά
Περίληψη:
Η οικογένεια των ριβονουκλεασών κ είναι μια ορθόλογη οικογένεια πρωτεϊνών που
αντιπροσωπεύεται σε ένα πολύ μεγάλο εύρος μεταζώων και εξαπλώνεται από το φύλο
των Κνιδοζώων έως την τάξη των θηλαστικών. Η παρούσα διδακτορική διατριβή αφορά
τον ανθρώπινο αντιπρόσωπο της οικογένειας και κινήθηκε σε δύο κατευθύνσεις. Η
πρώτη περιλαμβάνει την πληρέστερη ενζυμική μελέτη της human RNase κ, ενώ η
δεύτερη τον προσδιορισμό αμινοξικών καταλοίπων που συμβάλλουν στη
λειτουργικότητα του ενζύμου.
Στα πλαίσια του πρώτου στόχου διαπιστώθηκε ότι η human RNase κ υδρολύει
επιλεκτικά και κατά σειρά προτίμησης τους ApG και ApU δεσμούς σε μονόκλωνα RNA
υποστρώματα, ενώ η ενεργότητά της βρέθηκε να επηρεάζεται από την αλληλουχία των
βάσεων εκατέρωθεν του δεσμού υδρόλυσης. Στα πλαίσια του δεύτερου στόχου
προσδιορίστηκε η ύπαρξη ενός ενδομοριακού δισουλφιδικού δεσμού μεταξύ των
καταλοίπων κυστεΐνης 6 και 69 της ανθρώπινης πρωτεΐνης, απαραίτητου για την
ενεργότητα της RNase κ, ενώ διαπιστώθηκε ότι τα κατάλοιπα κυστεΐνης 7, 14 και
85 δεν εμπλέκονται στην ενζυμική ενεργότητα. Τέλος, η στόχευση συντηρημένων
αμινοξικών καταλοίπων με κατευθυνόμενη μεταλλαξογένεση οδήγησε στον εντοπισμό
ενός καταλοίπου αργινίνης υπεύθυνου για τη μη ειδική δέσμευση του RNA
υποστρώματος.
Λέξεις-κλειδιά:
Ριβονουκλεάση κ, Δισουλφιδικοί δεσμοί, Καταλυτική ενεργότητα, Κατευθυνόμενη μεταλλαξογένεση, Αποικοδόμηση RNA
Ευρετήριο:
Όχι
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
0
Εικονογραφημένη:
Ναι
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
239
Αριθμός σελίδων:
vii, 213
Αρχείο:
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο.

document.pdf
8 MB
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο.