Κατασκευή πλασμιδιακού φορέα έκφρασης της RanBPM για in vivo λειτουργικές μελέτες της αλληλεπίδρασης των πρωτεϊνών RanBPM και BM88/Cend1 κατά τη νευρογένεση

Διπλωματική Εργασία uoadl:1312187 240 Αναγνώσεις

Μονάδα:
Διατμηματικό / Διϊδρυτικό ΠΜΣ Μοριακή Ιατρική
Βιβλιοθήκη Επιστημών Υγείας
Ημερομηνία κατάθεσης:
2014-11-20
Έτος εκπόνησης:
2014
Συγγραφέας:
Γάκη Γεωργία
Στοιχεία επιβλεπόντων καθηγητών:
Αναπληρωτής Καθηγητής Αντώνης Σταματάκης, Ρεβέκκα Μάτσα, Δήμητρα Θωμαΐδου
Πρωτότυπος Τίτλος:
Κατασκευή πλασμιδιακού φορέα έκφρασης της RanBPM για in vivo λειτουργικές μελέτες της αλληλεπίδρασης των πρωτεϊνών RanBPM και BM88/Cend1 κατά τη νευρογένεση
Γλώσσες εργασίας:
Ελληνικά
Μεταφρασμένος τίτλος:
Construction of expression plasmid vector of RanBPM for in vivo functional studies of the interaction of the proteins RanBPM and BM88 / Cend1 during neurogenesis
Περίληψη:
Κατά τη διάρκεια της ανάπτυξης, η συντονισμένη ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου
και της διαφοροποίησης των προγονικών νευρικών κυττάρων είναι απαραίτητη για
την παραγωγή των κατάλληλων αριθμών και τύπων ώριμων κυττάρων. Ένα από τα μόρια
που εμπλέκονται στη διαδικασία αυτή είναι η πρωτεΐνη «ικρίωμα» (scaffolding)
RanBPM που εκφράζεται στο ανοσοποιητικό και το νευρικό σύστημα (Murrin et al
2007). Προηγούμενες in vitro μελέτες έχουν δείξει ότι η RanBPM αλληλεπιδρά με
την πρωτεΐνη BM88/Cend1 (Tsioras et al 2013). Η Cend1 είναι νευροειδική
πρωτεΐνη που εμπλέκεται τόσο στην έξοδο των νευρικών βλαστικών/προγονικών
κυττάρων από τον κυτταρικό κύκλο όσο και στη νευρωνική διαφοροποίηση (Koutmani
et al 2004, Politis et al 2007, Sergaki et al 2010). Σκοπός της παρούσας
ερευνητικής εργασίας ήταν η κατασκευή πλασμιδιακού φορέα έκφρασης της RanBMP
για in vivo λειτουργικές μελέτες των μορίων RanBMP και Cend1 κατά τη
νευρογένεση. Αρχικά, κατασκευάστηκε πλασμιδιακός φορέας ο οποίος συν-εκφράζει
τη RanBPM μαζί με μία φθορίζουσα πρωτεΐνη. Η επαλήθευση της λειτουργικότητας
του ανασυνδιασμένου πλασμιδιακού φορέα πραγματοποιήθηκε με πειράματα
επιμολύνσεων στην κυτταρική σειρά HEK293T και η υπερέκφραση του συγκεκριμένου
μορίου ελέγχθηκε με ανοσοαποτύπωμα και με χρώσεις ανοσοφθορισμού. Τελικά,
ακολούθησε η διαμόλυνση εμβρυικού εγκεφάλου μυός (Ε 14,5) με τους πλασμιδιακούς
φορείς υπερέκφρασης των πρωτεϊνών RanBMP και Cend1. Συμπερασματικά, στην
παρούσα εργασία παρουσιάζονται τα πρώτα αποτελέσματα της in vivo αλληλεπίδρασης
των πρωτεινών RanBMP και Cend1 και ο ρόλος τους κατά τη νευρογένεση.
Λέξεις-κλειδιά:
RanBPM, Cend1, Nευρογένεση, Eμβρυικός εγκέφαλος, Πλασμίδιο
Ευρετήριο:
Όχι
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
0
Εικονογραφημένη:
Ναι
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
122
Αριθμός σελίδων:
110
Αρχείο:
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο. H πρόσβαση επιτρέπεται μόνο εντός του δικτύου του ΕΚΠΑ.

document.pdf
3 MB
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο. H πρόσβαση επιτρέπεται μόνο εντός του δικτύου του ΕΚΠΑ.