Στοιχεία επιβλεπόντων καθηγητών:
Καθηγήτρια Φωτεινή Στυλιανοπούλου, Κλινάκης Απόστολος,
Περίληψη:
Οι ινσουλινοειδείς αυξητικοί παράγοντες IGFI και IGFII είναι μικρά μιτογόνα
πολυπεπτίδια, δομικά ομόλογα με την προινσουλίνη, παράγονται από πολλούς ιστούς
και εμφανίζουν αυτοκρινή/παρακρινή και ενδοκρινή δράση. Ανήκουν στην ευρύτερη
οικογένεια των ΙGFs(ΙGFIR, IGFIIR, IGFBPs). Οι ΙGFs είναι καθοριστικοί για την
ανάπτυξη στα θηλαστικά και παράγονται κυρίως στο ήπαρ. Ο IGFII, ακολουθεί το
πρότυπο γονιδιακής αποτύπωσης. Σε μελέτες, που αφορούν τη γονιδιακή έκφραση των
δύο παραγόντων με πειράματα σε knock-out ποντίκια, οι φαινότυποι που προκύπτουν
είναι μεταλλαγμένοι και παρατηρείται το φαινόμενο του νανισμού. Ενώ η
ταυτόχρονη απουσία των δύο παραγόντων έχει αθροιστικό αποτέλεσμα στο φαινότυπο
των εμβρύων. Με βάση τα παραπάνω, σε knock-in διαγονιδιακά ποντίκια που
εκφράζουν τη φθορίζουσα πρωτείνη YFP, στη κωδική περιοχή του γονιδίου του IGFI
και την πρωτείνη CHERRY στη θέση του ΙGFII,έγιναν πειράματα ανοσοφοθρισμού,
RT-PCR και ανοσοστυπώματος κατά western. Μετά τη διασταύρωση αρσενικών
ποντικών, που εκφράζουν YFP/IGFI-IGFII/CHERRY, με θηλυκά που εκφράζουν
IGFI/YFP, έπειτα από χρονικά σχεδιασμένες εγκυμοσύνες, έγινε συλλογή των
εμβρύων τις εμβρυικές ημέρες ανάπτυξης Ε14,5 και Ε18,5) για τον έλεγχο της
έκφρασης των παραγόντων. Τελικά επιβεβαιώθηκε η λειτουργικότητα των ποντικών
αυτών για τη μελλοντική χρήση τους σε αναπτυξιακό επίπεδο, αλλά και σε
μηχανισμούς καρκινογένεσης.
Λέξεις-κλειδιά:
Διαγονιδιακά ποντίκια, Ινσουλινοειδείς αυξητικοί παράγοντες, Γονιδιακή αποτύπωση, Νανισμός, Εμβρυική ανάπτυξη
