Μονάδα:
Κατεύθυνση Καρκίνος Πνεύμονα: Σύγχρονη Κλινικοεργαστηριακή Προσέγγιση και ΈρευναΒιβλιοθήκη Επιστημών Υγείας
Ημερομηνία κατάθεσης:
2016-04-18
Στοιχεία επιβλεπόντων καθηγητών:
Καθηγητής Κωνσταντίνος Συρίγος
Πρωτότυπος Τίτλος:
In vitro ανίχνευση και ποσοτική μέτρηση του συμπλέγματος του επιδερμοειδούς αυξητικού παράγοντα (Epidermal Growth Factor Receptor - EGFR)
Γλώσσες εργασίας:
Ελληνικά
Περίληψη:
Ο υποδοχέας του επιδερμοειδούς αυξητικού παράγοντα (Epidermal Growth Factor
Receptor – EGFR) αποτελεί θεραπευτικό στόχο στο μη μικροκυτταρικό καρκίνο
πνεύμονα (ΜΜΚΠ), ως θεραπεία πρώτης γραμμής σε ασθενείς με αδενοκαρκίνωμα που
φέρουν μεταλλάξεις του EGFR. Αυτή η ομάδα ασθενών με παρουσία μεταλλάξεων που
προκαλούν ενεργοποίηση του υποδοχέα έχει βρεθεί ότι έχουν καλύτερη συνολική
επιβίωση συγκριτικά με τους ασθενείς χωρίς μετάλλαξη, ανεξάρτητα από το στάδιο
νόσου ή τη θεραπεία. Ωστόσο, τα δεδομένα για τον προγνωστικό ρόλο της ολικής
έκφρασης του EGFR στο μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα, όπως μετράται με
τη χρήση ανοσοϊστοχημείας είναι αντικρουόμενα, με τις περισσότερες μελέτες να
μην έχουν δείξει προγνωστική σημασία. Η εκτίμηση του αριθμού των αντιγράφων
του γονιδίου του EGFR με τη χρήση φθορίζοντος in situ υβριδισµού (fluorescent
in situ hybridization - FISH) δεν έχει δείξει επίσης με συνέπεια συσχετισμό με
την πρόγνωση. Η τεχνική PLA (Proximity ligation assay) είναι μία μέθοδος για
την ανίχνευση πρωτεϊνικών συμπλεγμάτων σχετιζόμενων με λειτουργική
σηματοδότηση. Το PLA έχει χρησιμοποιηθεί στο παρελθόν για την ανίχνευση της
αλληλεπίδρασης μεταξύ του EGFR και του GRB2 (Growth factor receptor bound
protein 2). Το GRB2 είναι μία πρωτεΐνη, η οποία προσδένεται στο
φωσφορυλιωμένο ενεργοποιημένο υποδοχέα και η αλληλεπίδραση τους σχετίζεται με
την ενεργοποίηση του μονοπατιού MAPK/ERK.
Στην παρούσα μελέτη, η τεχνική PLA χρησιμοποιήθηκε για να ανιχνευθεί η
αλληλεπίδραση μεταξύ EGFR και GRB2, η οποία μετρήθηκε ποσοτικά με τη χρήση της
τεχνολογίας AQUA [Automated Quantitative Immunofluorescence (QIF)]. Η μέθοδος
αυτή επιτρέπει την ποσοτική μέτρηση του σήματος του ανοσοφθορισμού. Το
EGFR:GRB2 PLA βρέθηκε ότι σχετίζεται με την παρουσία ενεργοποίησης
(φωσφορυλίωσης) του ενδοκυττάριου τμήματος (τυροσινικής κινάσης) του EGFR σε 6
κυτταρικές σειρές, όπως μετρήθηκε με Western Blot. Το PLA ποσοτικοποιημένο με
τη χρήση της AQUA, πέτυχε την αντικειμενική και αναπαραγώγιμη μέτρηση της
αλληλεπίδρασης του EGFR και του GRB2 σε συνεχόμενες τομές της ίδιας αλλά και
διαφορετικών περιοχών του όγκου.
Λέξεις-κλειδιά:
Σύμπλοκο, Υποδοχέας, Επιδερμοειδής, Πρωτεΐνη, Ανοσοφθορισμός
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
0
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
99
