Μονάδα:
Κατεύθυνση Αναλυτική ΧημείαΒιβλιοθήκη Σχολής Θετικών Επιστημών
Ημερομηνία κατάθεσης:
2016-10-24
Στοιχεία επιβλεπόντων καθηγητών:
Κουππάρης Μιχαήλ Καθηγητής
Πρωτότυπος Τίτλος:
Ανάπτυξη και Επικύρωση Μεθόδου για το Φασματοφωτομετρικό Προσδιορισμό Ολικού Σιδήρου και Συνδεδεμένου στην Τρανσφερρίνη Σιδήρου σε Ανθρώπινο Ορό
Γλώσσες εργασίας:
Ελληνικά
Μεταφρασμένος τίτλος:
Development and Validation of Spectrophotometric Method for the Determination of Total Iron and Transferrin Bound Iron in Human Serum
Περίληψη:
Τα ενδοφλέβια σκευάσματα σιδήρου ενδείκνυνται για τη θεραπεία της σοβαρής
σιδηροπενικής αναιμίας. Οι μελέτες βιοϊσοδυναμίας τέτοιων σκευασμάτων είναι
πολύπλοκες λόγω των ενδογενών επιπέδων σιδήρου και της ανάγκης να
ποσοτικοποιηθούν ανεξάρτητα ο ολικός σίδηρος και ο συνδεδεμένος στην
τρανσφερρίνη σίδηρος. Στην παρούσα εργασία, αναπτύχθηκε και επικυρώθηκε μια
εκλεκτική μέθοδος, κατάλληλη να χρησιμοποιηθεί σε μελέτες βιοϊσοδυναμίας
ενδοφλέβιων σκευασμάτων σιδήρου, σύμφωνα με τις οδηγίες του Ευρωπαϊκού
Οργανισμού Φαρμάκων και του Αμερικάνικου Οργανισμού Τροφίμων και Φαρμάκων.
Για τον προσδιορισμό του ολικού σιδήρου εφαρμόστηκε μια φασματοφωτομετρική
μέθοδος. Τα δείγματα ορού αραιώθηκαν με διάλυμα φυσιολογικού ορού και
κατεργάστηκαν με ένα όξινο αντιδραστήριο αποδιάταξης, που περιέχει ρυθμιστικό
οξεικών και απελευθερώνει το σίδηρο από το σύμπλεγμα σιδήρου-σακχαρόζης (τη
φαρμακευτική μορφή χορήγησης σιδήρου) και από την τρανσφερρίνη. Έπειτα, ένα
έγχρωμο αντιδραστήριο (φερένιο) αντιδρά με τον ανηγμένο σίδηρο σχηματίζοντας
ένα κυανό σύμπλοκο. Στην προκατεργασία των δειγμάτων χρησιμοποιήθηκε ένα
ρομποτικό σύστημα αυτόματης προσθήκης αντιδραστηρίων. Η απορρόφηση του κυανούς
συμπλόκου μετρήθηκε σε φασματοφωτόμετρο ανάγνωσης πλάκας πολλών φρεατίων στα
604 nm. Προκειμένου, να προσδιοριστεί ο συνδεδεμένος στην τρανσφερρίνη σίδηρος
(TBI), τα αραιωμένα δείγματα εκλούστηκαν μέσω μιας στήλης εκχύλισης στερεάς
φάσης από πολυϊμίνη, προκειμένου να κατακρατηθεί ο ελεύθερος και ο συνδεδεμένος
στη σακχαρόζη σίδηρος. Έπειτα, το έκλουσμα (που περιείχε μόνο τον ΤΒΙ)
αναλύθηκε με τη διαδικασία που εφαρμόστηκε για το προσδιορισμό του ολικού
σιδήρου.
Για την ποσοτικοποίηση του ολικού σιδήρου, κατασκευάστηκε καμπύλη βαθμονόμησης
σε εύρος 0,25 – 30,0 μgmL-1 συν τον ενδογενή σίδηρο, χρησιμοποιώντας
εμβολιασμένα δείγματα ορού και λαμβάνοντας υπόψη τα ενδογενή επίπεδα σιδήρου.
Παρόμοια, για την ποσοτικοποίηση του TBI, κατασκευάστηκε καμπύλη βαθμονόμησης
σε εύρος 0,25 – 8,0 μgmL-1, συν τον ενδογενή σίδηρο. Αποδεκτές τιμές
πιστότητας και ακρίβειας προέκυψαν για συγκεντρώσεις που καλύπτουν ολόκληρο το
εύρος και των δύο καμπυλών βαθμονόμησης. Η σταθερότητα και η ακεραιότητα κατά
την αραίωση των δειγμάτων βρέθηκε να είναι επίσης εντός των προκαθορισμένων
προδιαγραφών.
Λέξεις-κλειδιά:
ολικός σίδηρος, συνδεδεμένος στην τρανσφερρίνη σίδηρος, ανθρώπινος ορός, σακχαρούχος σίδηρος, φερένιο
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
4
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
31
Αρχείο:
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο. H πρόσβαση επιτρέπεται μόνο εντός του δικτύου του ΕΚΠΑ.
document.pdf
2 MB
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο. H πρόσβαση επιτρέπεται μόνο εντός του δικτύου του ΕΚΠΑ.
