Μονάδα:
Κατεύθυνση Έλεγχος Φαρμακευτικών Ενώσεων (Φαρμακευτική Ανάλυση)Βιβλιοθήκη Σχολής Θετικών Επιστημών
Ημερομηνία κατάθεσης:
2012-07-05
Συγγραφέας:
Κουκούλα Μαρία
Στοιχεία επιβλεπόντων καθηγητών:
Λουκάς Ιωάννης Καθηγ.(Επιβλέπων), Μ. Κουππάρης Καθηγ., Γ. Φώσκολος Καθηγ.
Πρωτότυπος Τίτλος:
Φαρμακογεννετικός έλεγχος σε δείγματα πλάσματος εθελοντών μετά από λήψη ομεπραζόλης με χρήση μεθόδων LC-MS/MS και Real Time-PCR.
Γλώσσες εργασίας:
Ελληνικά
Περίληψη:
Η ομεπραζόλη ανήκει στους αναστολείς αντλίας πρωτονίων, μια κατηγορία φαρμάκων
που δρουν στο στομάχι και μειώνουν την οξύτητα του περιεχομένου του. Στην
παρούσα διατριβή ειδίκευσης αναπτύχθηκε και επικυρώθηκε μια νέα αναλυτική
μέθοδος προσδιορισμού της ομεπραζόλης στο ανθρώπινο πλάσμα με χρήση της υψηλής
εκλεκτικότητας και ευαισθησίας τεχνικής LC-MS/MS. Ως εσωτερικό πρότυπο
χρησιμοποιήθηκε η παντοπραζόλη. Για την εκτέλεση χρωματογραφίας
χρησιμοποιήθηκε αναλυτική στήλη YMC-Pack (C8) μεγέθους σωματιδίων 120A,
διαμέτρου πόρων 3 μm και διαστάσεων 50 x 4,6 mm, κινητή φάση μίγμα 75%
ακετονιτριλίου και 10% μυρμιγκικού οξέος 10mM και ταχύτητα ροής 0,6 mL/min. H
ανίχνευση των ουσιών στο σύστημα MS/MS εκτελέστηκε σε MRM με παρακολούθηση των
μεταπτώσεων m/z 345,93>198,20 για την ομεπραζόλη και 383,70>200,10 για την
παντοπραζόλη, μετά από ιονισμό τους σε λειτουργία ESI+ και βελτιστοποίηση των
παραμέτρων της πηγής ιονισμού. Ο χρόνος ανάσχεσης για τις δύο ουσίες ήταν 0,90
min και ο ολικός χρόνος ανάλυσης ανά δείγμα 1,5 min.
Η μέθοδος επικυρώθηκε σύμφωνα με εκτέλεση 6 προσδιορισμών (RUN1-6). Η καμπύλη
αναφοράς ήταν γραμμική στο εύρος 12-1500 ng/mL, τόσο για τον κάθε προσδιορισμό
όσο και για το σύνολο τους, η δε γραμμικότητα επιβεβαιώθηκε με εκτέλεση
ελέγχου έλλειψης προσαρμογής. Η ορθότητα και η επαναληψιμότητα των μετρήσεων
τόσο εντός όσο και μεταξύ των προσδιορισμών βρέθηκε εντός των επιτρεπτών, από
τις επίσημες οδηγίες, ορίων. Η σταθερότητα του αναλύτη εντός του πλάσματος,
καθώς επίσης και η σταθερότητα των χρησιμοποιούμενων διαλυμάτων του αναλύτη,
ελέγχθηκε και κρίθηκε ικανοποιητική. Η μέθοδος εφαρμόστηκε στη μελέτη
φαρμακοκινητικών παραμέτρων σε δείγματα 40 υγιών εθελοντών μετά από απλή
χορήγηση σκευάσματος ομεπραζόλης περιεκτικότητας 20 mg.
Η παραπάνω μελέτη επιτεύχθηκε με χρήση της μεθόδου αλυσιδωτής αντίδρασης
πολυμεράσης σε πραγματικό χρόνο, RT-PCR (real time polymerase chain reaction).
Η PCR οδηγεί σε ενίσχυση ενός τμήματος DNA κατά ένα δισεκατομμύριο φορές. Ένα
μόριο DNA μπορεί να ενισχυθεί έτσι ώστε οι τελικές ποσότητες που θα προκύψουν
να επιτρέπουν τον χαρακτηρισμό και τη χρήση του.
Στόχος της παρούσας εργασίας ήταν ο φαρμακογενετικός έλεγχος ομεπραζόλης σε
δείγματα πλάσματος εθελοντών, με χρήση των παραπάνω μεθόδων.
Λέξεις-κλειδιά:
Ομεπραζόλη, Φασματομετρία μαζών, Πολυμεράση, Φαρμακογεννετική, Ανθρώπινο πλάσμα
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
2
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
96
Αρχείο:
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο.
document.pdf
4 MB
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο.
