Application of diagnostics for mosquito vector incrimination and innovative biotechnology-based methods for disease control

Διπλωματική Εργασία uoadl:2884486 169 Αναγνώσεις

Μονάδα:
Κατεύθυνση Μικροβιακή Βιοτεχνολογία
Βιβλιοθήκη Σχολής Θετικών Επιστημών
Ημερομηνία κατάθεσης:
2019-11-01
Έτος εκπόνησης:
2019
Συγγραφέας:
Μπαλάσκα Σοφία
Στοιχεία επιβλεπόντων καθηγητών:
Γιώργος Διαλλινάς, Καθηγητής Μοριακής Μικροβιολογίας, Τμήμα Βιολογίας, ΕΚΠΑ
Πρωτότυπος Τίτλος:
Application of diagnostics for mosquito vector incrimination and innovative biotechnology-based methods for disease control
Γλώσσες εργασίας:
Αγγλικά
Μεταφρασμένος τίτλος:
Εφαρμογή διαγνωστικών τεχνικών για την αξιολόγηση της ανθεκτικότητας σε εντομοκτόνα κουνουπιών-φορέων ασθενειών και διερεύνηση βιοτεχνολογικών μεθόδων για τον έλεγχο των ασθενειών
Περίληψη:
Τα κουνούπια, ειδικότερα είδη των γενών Aedes, Anopheles και Culex, είναι οι πιο κοινοί φορείς ασθενειώνπαγκοσμίως, προκαλώντας περισσότερα από 500 εκατομμύρια ανθρώπινα κρούσματα ετησίως, εξαιτίας της μετάδοσης παθογόνων, όπως το παράσιτο της ελονοσίας, ο Δάγκειος ιός, ο ιός του Δυτικού Νείλου, ο ιός Zika, κ.λπ. Η πλειοψηφία των κρουσμάτων συμβαίνει στην Αφρική, την Κεντρική και Λατινική Αμερική και την νοτιοανατολική Ασία, ωστόσο, τις τελευταίες 2 δεκαετίες, ορισμένες ασθένειες έχουν (επαν)εμφανιστεί και στην Ευρώπη.
Η καταπολέμηση των εντομομεταδιδόμενων ασθενειών βασίζεται σε μεγάλο βαθμό στον έλεγχο του εντόμου-φορέα, κυρίως με τη χρήση εντομοκτόνων (π.χ. πυρεθροειδή, οργανοφωσφορικά, ρυθμιστές ανάπτυξης). Όμως, ο περιορισμένος αριθμός εγκεκριμένων εντομοκτόνων σε συνδυασμό με τηναυξανόμενη εμφάνιση ανθεκτικότητας σ’αυτά τονίζουν τη σημασία της συνεχούς εντομολογικής επιτήρησης. Ο αριθμός τέτοιων μελετών για την Ελλάδα είναι μικρός. Το είδος Aedesalbopictus, γνωστό ως Ασιατικό κουνούπι τίγρης, αποτελεί σημαντικό κίνδυνο για τη δημόσια υγεία, με παγκόσμια διασπορά. Η παρουσία του στην Ελλάδα είναι ευρεία και, πιθανώς, συνδεδεμένη με τις πρόσφατες επιδημίες του ιού του Δυτικού Νείλου. Το πρώτο μέρος της παρούσας μεταπτυχιακής μελέτης αφορά στην ανάλυση της ανθεκτικότητας σε εντομοκτόνα πληθυσμών Ae. albopictusαπό διαφορετικές περιοχές της Ελλάδας, με τη χρήση μοριακών διαγνωστικών εργαλείων. Η μεταλλαγή F1534C στο γονίδιο που κωδικοποιεί για το κανάλι νατρίου, που προσδίδει ανθεκτικότητα στα πυρεθροειδή, βρέθηκε σε όλες τις δειγματοληπτικές περιοχές, με υψηλότερη συχνότητα στην Αθήνα, ενώ η Ι1532Τ στο ίδιο γονίδιο εντοπίστηκε για πρώτη φορά στη χώρα μας, με σχετικά χαμηλή συχνότητα. Ανθεκτικότητα στο temephos, λόγω υπερέκφρασης των καρβοξυλεστερασών 3 και 6, βρέθηκε επίσης διαδεδομένη. Τέλος, δεν ανιχνεύθηκε κάποια μεταλλαγή σχετιζόμενη με ανθεκτικότητα στο προνυμφοκτόνο diflubenzuron.
Οι περιορισμοί που προκύπτουν από την εκτενή χρήση εντομοκτόνων υποδεικνύουν την ανάγκη εφαρμογής ολοκληρωμένης στρατηγικής ελέγχου των κουνουπιών-φορέων. Στο δεύτερο τμήμα της συγκεκριμένης εργασίας, μελετήθηκεμια μέθοδος γενετικού ελέγχου μεταδιδόμενων ασθενειών: πολυ-αμιδο-αμίνες (PAAs) αξιολογήθηκαν ως πολυμερικοί φορείς δίκλωνου RNA (dsRNA) στο κουνούπι An. gambiae, με σκοπό τη σίγηση γονιδίων (RNAi) του φορέα που υποβοηθούν τη διέλευση του παρασίτου της ελονοσίας από το έντερό του. dsRNA εναντίον των γονιδίων CACTUS και ESP του κουνουπιού συζεύκτηκαν με PAAs και εξετάστηκε η σταθερότητα των νανοσωματιδίων σε αναγωγικό περιβάλλον. Εν συνεχεία, τα νανοσωματίδια χορηγήθηκαν σε ενήλικα κουνούπια μέσω τροφής ή εμβολίου. Η σίγηση των γονιδίων-στόχων στο έντερο, ήταν ικανοποιητική, ως πρώτη ένδειξη. Αυτά τα προκαταρκτικά αποτελέσματα θα αξιοποιηθούν ως θεμέλια στα επόμενα πειραματικά βήματα με ορισμένες κάποιες βελτιώσεις/ τροποποιήσεις.
Κύρια θεματική κατηγορία:
Επιστήμες Υγείας
Λέξεις-κλειδιά:
κουνούπια-φορείς ασθενειών, εντομολογική επιτήρηση, ασιατικό κουνούπι τίγρης, ανθεκτικότητα σε εντομοκτόνα, δημόσια υγεία, νανοσωματίδια, ελονοσία
Ευρετήριο:
Ναι
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
2
Εικονογραφημένη:
Ναι
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
143
Αριθμός σελίδων:
110
Master Thesis-SBalaska.pdf (3 MB) Άνοιγμα σε νέο παράθυρο