Μονάδα:
Διατμηματικό / Διϊδρυτικό ΠΜΣ Μοριακή ΙατρικήΒιβλιοθήκη Επιστημών Υγείας
Ημερομηνία κατάθεσης:
2013-05-17
Συγγραφέας:
Κοντοστάθη Γεωργία
Στοιχεία επιβλεπόντων καθηγητών:
Νικόλαος Π. Ανάγνου
Πρωτότυπος Τίτλος:
Λειτουργική μελέτη νέων λεντιϊκών φορέων shRNAs έναντι των ρυθμιστών της γ-σφαιρίνης BCL11A και KLF1 για τη γονιδιακή θεραπεία της β-θαλασσαιμίας
Γλώσσες εργασίας:
Ελληνικά
Περίληψη:
O όρος θαλασσαιμία προκύπτει από τις ελληνικές λέξεις «θάλασσα» και «αίμα» και
αποτελεί όρο που περιγράφει την άλλοτε «μεσογειακή αναιμία». Η θαλασσαιμία
αφορά διαταραχές που σχετίζονται με ελαττωματική σύνθεση των α- ή β- αλυσίδων
της αιμοσφαιρίνης ΗbA (Hemoglobin A) (α2β2). Οι β-θαλασσαιμίες οφείλονται σε
περισσότερες από 200 μεταλλάξεις και έχουν ως αποτέλεσμα τη μειωμένη ή τη
μηδενική σύνθεση των β-αλύσων των αιμοσφαιρινών. Μια νέα προοπτική στην
θεραπεία της β-θαλασσαιμίας αποτελεί η γονιδιακή θεραπεία η οποία αξιοποιεί τα
εργαλεία των λεντιϊκών φορέων για τη μεταφορά και την ένθεση του διαγονιδίου (β-
σφαιρίνη ή γ-σφαιρίνη) στο γονιδίωμα του κυττάρου στόχου, που στην περίπτωση
της β-θαλασσαιμίας είναι τα αρχέγονα αιμοποιητικά κύτταρα. Οι μεταγραφικοί
παράγοντες, BCL11A (B-cell lymphoma/leukemia 11A) και KLF1 (Krueppel-like
factor 1) ελέγχουν την έκφραση της εμβρυϊκής αιμοσφαιρίνης HbF με 2 τρόπους: 1)
Άμεσα: Ο KLF1 αυξάνει την έκφραση της β-σφαιρίνης 2) Έμμεσα: Ο KLF1 αυξάνει
την έκφραση του BCL11A, o oποίος με τη σειρά του καταστέλλει την έκφραση της γ-
σφαιρίνης. Η καταστολή των παραπάνω παραγόντων με shRNAs αυξάνει την έκφραση
της γ-σφαιρίνης, προσδίδοντας δυνητικό θεραπευτικό αποτέλεσμα στη β-θαλασσαιμία.
Σκοπός: Η βελτιστοποίηση της ερυθροειδικής διαφοροποίησης των CD34+ κυττάρων ex
vivo και η αξιολόγηση λεντιϊκών φορέων που φέρουν τα στοιχεία shBCL11A και
shKLF1 in vitro.
Συμπεράσματα: Οι φορείς για τον shBCL11A και τον shKLF1 είχαν μέσο τίτλο
1.36X107 TU/ml και 1.42X107 TU/ml αντίστοιχα και η αποδοτικότητα τους
εξετάστηκε σε CD34+ κύτταρα ομφαλίου αίματος που είχαν μεταχθεί με τους
παραπάνω φορείς με πολλαπλότητα μόλυνσης MOI 20. Τα CD34+ κύτταρα οδηγήθηκαν
προς τον ερυθροειδικό φαινότυπο χρησιμοποιώντας το κατάλληλο πρωτόκολλο και η
έκφραση της HbF καθορίστηκε με κυτταρομετρία ροής (FACS) και για τους 2
φορείς. Στις υγρές καλλιέργειες καθώς και σε κλωνικό επίπεδο παρατηρήθηκε τάση
για αύξηση της HbF η οποία επάγεται από τους λεντιϊκούς φορείς shBCL11A και
shKLF1. Οι φορείς shBCL11A και shKLF1 παρουσίασαν παρόμοιο μέσο ποσοστό
μεταγωγής με τον πρώτο να εμφανίζει 46.6% και τον δεύτερο 45%, ενώ ο μέσος
αριθμός αντιγράφων φορέα/κύτταρο για τους φορείς shBCL11A και shKLF1 ήταν 1.12
και 1.05 αντίστοιχα.
Λέξεις-κλειδιά:
β-θαλασσαιμία, Eμβρυϊκή αιμοσφαιρίνη, A αιμοσφαιρίνη, Γονιδιακή θεραπεία, Aρχέγονα αιμοποιητικά κύτταρα
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
0
Αρχείο:
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο. H πρόσβαση επιτρέπεται μόνο εντός του δικτύου του ΕΚΠΑ.
document.pdf
3 MB
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο. H πρόσβαση επιτρέπεται μόνο εντός του δικτύου του ΕΚΠΑ.
