Μονάδα:
Κατεύθυνση Φαρμακευτική Ανάλυση - Έλεγχος ποιότηταςΒιβλιοθήκη Σχολής Θετικών Επιστημών
Ημερομηνία κατάθεσης:
2019-01-08
Συγγραφέας:
Γεωργοπάνου Ευτυχία
Στοιχεία επιβλεπόντων καθηγητών:
Παντερή Ειρήνη, Καθηγήτρια, Τμήμα Φαρμακευτικής, Εθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο Αθηνών
Πρωτότυπος Τίτλος:
Ανάπτυξη μεθόδου σάρωσης πεπτιδίων μικρού μοριακού βάρους σε ούρα αθλητών με την τεχνική UPLC/Q-TOF-MS
Γλώσσες εργασίας:
Ελληνικά
Μεταφρασμένος τίτλος:
Ανάπτυξη μεθόδου σάρωσης πεπτιδίων μικρού μοριακού βάρους σε ούρα αθλητών με την τεχνική UPLC/Q-TOF-MS
Περίληψη:
Σκοπός της εργασίας ήταν η ανάπτυξη μεθόδου με την τεχνική UPLC/QTOF-MS μετά από εκχύλιση στερεάς φάσης για την ποιοτική ανίχνευση μικρών πεπτιδίων απελευθέρωσης αυξητικής ορμόνης (GHRPs) σε ούρα αθλητών. Συγκεκριμένα, αξιολογήθηκαν τα ακόλουθα πεπτίδια : GHRP-2, GHRP-3, GHRP-6_Free Acid, Anamorelin, Capromorelin, Ibutamoren, AOD-9604. Για την επεξεργασία των δειγμάτων χρησιμοποιήθηκαν ιοντανταλλακτικά φυσσίγια εκχύλισης στερεάς φάσης. Το υλικό πλήρωσης έχει ένα άπολο άκρο και μία καρβοξυλική ομάδα.
Η ανάλυση των δειγμάτων πραγματοποιήθηκε με υγροχρωματογραφικό σύστημα υπερυψηλής απόδοσης (UPLC) σε συνδυασμό με το φασματόμετρο μαζών με τετραπολικό αναλυτή μαζών συζευγμένο με αναλυτή χρόνου πτήσης (LC/QTOF-MS). Για τον ιοντισμό των ουσιών, έγινε χρήση ιοντισμού με ηλεκτροψεκασμό θετικής πολικότητας (electrospray ionization, (+) ESI).
Για την ανίχνευση των πεπτιδίων απαραίτητη ήταν η επίτευξη μείωσης της επίδρασης του μητρικού υλικού έτσι ώστε να λαμβάνουμε χρωματογραφήματα με εμφανείς και καθαρές κορυφές των μονοϊονισμένων και δισιονισμένων ενώσεων. Έγιναν διάφορες δοκιμές με αλλαγή στήλης και αλλαγή στην πειραματική διαδικασία μέχρι να υπάρξουν οι βέλτιστες συνθήκες για την ανίχνευση των πεπτιδίων απελευθέρωσης αυξητικής ορμόνης.
Η μέθοδος αξιολογήθηκε ως προς τη σάρωση των συγκεκριμένων πεπτιδίων, χρησιμοποιώντας ως εσωτερικό πρότυπο το πεπτίδιο Βασοπρεσσίνη-Λυσίνη και ελέγχθηκαν και αξιολογήθηκαν οι εξής παράμετροι:
• Σχετικός Χρόνος Ανάσχεσης
• Ειδικότητα της μεθόδου για κάθε αναλυόμενη ουσία
• Έλεγχος επιμόλυνσης
• Επίδραση μητρικού υλικού και % ανάκτηση
• Ικανότητα Προσδιορισμού Απαγορευμένων Ουσιών
Συμπερασματικά, η μέθοδος αξιολογήθηκε ως επαρκής και κατάλληλη για την ανίχνευση πεπτιδίων απελευθέρωσης της αυξητικής ορμόνης.
Κύρια θεματική κατηγορία:
Θετικές Επιστήμες
Λέξεις-κλειδιά:
Έλεγχος ντόπινγκ, πεπτίδια, UPLC/Q-TOF-MS, διαδικασία σάρωσης, επικύρωση
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
2
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
43
