Μονάδα:
Κατεύθυνση Κλινική Βιοχημεία - Μοριακή ΔιαγνωστικήΒιβλιοθήκη Σχολής Θετικών Επιστημών
Ημερομηνία κατάθεσης:
2021-01-14
Συγγραφέας:
Γιαννοπούλου Αγγελική-Ιωάννα
Στοιχεία επιβλεπόντων καθηγητών:
κ.Σίδερης Διαμάντης, Αναπληρωτής Καθηγητής, Τμήμα Βιολογίας, Εθνικό και Καποδιστριακό Πανεπιστήμιο Αθηνών
Πρωτότυπος Τίτλος:
Επίδραση κυτταροστατικών φαρμάκων στα επίπεδα έκφρασης της RNase κ σε καρκινικές κυτταρικές σειρές
Γλώσσες εργασίας:
Ελληνικά
Αγγλικά
Μεταφρασμένος τίτλος:
Επίδραση κυτταροστατικών φαρμάκων στα επίπεδα έκφρασης της RNase κ σε καρκινικές κυτταρικές σειρές
Περίληψη:
Το Πολλαπλό Μυέλωμα (ΠΜ) αποτελεί πολυεστιακό πλασματοκυτταρικό νεόπλασμα εντοπιζόμενο στο μυελό που χαρακτηρίζεται από μονοκλωνική πρωτεΐνη στον ορό ή τα ούρα και σκελετικές διαταραχές (οστεολυτικές βλάβες) και συχνά συνοδεύεται από υπερασβεστιαιμία, αναιμία, νεφρική δυσλειτουργία, και υποτροπιάζουσες βακτηριακές λοιμώξεις. Πολλοί δείκτες χρησιμοποιούνται στη διάγνωση του. Οι ριβονουκλεάσες ανήκουν στην κατηγορία των νουκλεασών, μόρια τα οποία αποικοδομούν τα RNAs σε μικρότερα τμήματα και έχει αποδειχτεί τα τελευταία χρόνια η συμμετοχή τους σε πολλές περιπτώσεις καρκινογένεσης. Σκοπός της παρούσας μεταπτυχιακής εργασίας ήταν η μελέτη των επιπέδων έκφρασης των μεταγράφων κλασικό, 7, 9, 14, 20 του γονιδίου της ριβονουκλεάσης κ, μιας νουκλεάσης που μελετάται έντονα τα τελευταία χρόνια στο εργαστήριό μας, σε καρκινικές σειρές μυελώματος υπό την επίδραση κυτταροστατικών παραγόντων. Για την υλοποίηση της μελέτης μας βρέθηκαν οι τιμές συγκέντρωσης IC50 για τον κάθε παράγοντα με τη χρήση της μεθόδου ΜΤΤ στις κυτταρικές σειρές U266 και Η929. Έπειτα τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν σε φλάσκες χωρίς προσθήκη παράγοντα που χρησιμοποιήθηκαν ως controls και υπό την επίδραση αναστολέα πρωτεασώματος Bortezomib ή Carfilzomib για χρονικό διάστημα 24, 48 και 72 ωρών. Απομονώθηκε το RNA των κυττάρων, ακολούθησε έλεγχος της ποιότητάς του και δημιουργία cDNA μέσω αντίστροφης μεταγραφής. Η έκφραση των μεταγράφων μελετήθηκε με Real Time PCR ανάλυση με χρήση της χρωστικής SYBR Green και στη συνέχεια πραγματοποιήθηκε στατιστική επεξεργασία των αποτελεσμάτων για τη συσχέτιση των επιπέδων έκφρασης με τους παράγοντες.
Τα αποτελέσματα της στατιστικής ανάλυσης αποδεικνύουν οτι τα επίπεδα έκφρασης του μεταγράφου 14 είναι αυξημένα στην κυτταρική σειρά H929 και με τους δύο παράγοντες. Ακόμα, αύξηση της έκφρασης παρατηρήθηκε και για το μετάγραφο 9 στην κυτταρική σειρά Η929 με το Bortezomib. Στο μετάγραφο 20 παρουσιάστηκε μείωση της έκφρασης και στις δύο κυτταρικές σειρές, με τη διαφορά ότι στα H929 παρατηρήθηκε μόνο με τον παράγοντα Carfilzomib, ενώ στα U266 κύτταρα και με τους δύο παράγοντες. Συμπερασματικά, παρόλο που οι παρατηρήσεις μας δεν έδειξαν πολυ μεγάλες μεταβολές στην έκφραση, τα μετάγραφα 9, 14 και 20 μπορεί μελλοντικά θέτοντας νέους στόχους να προσφέρουν πληροφορίες ως προς τον ρόλο της RNase κ στο πολλαπλό μυέλωμα.
Κύρια θεματική κατηγορία:
Θετικές Επιστήμες
Λέξεις-κλειδιά:
RNase κ, πολλαπλό μυέλωμα, κυτταροστατικοί παράγοντες, αναστολείς πρωτεασώματος
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
0
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
103
