Σίγαση γονιδίων (RNA silencing) σε αναπαραγωγικό ιστό

Διπλωματική Εργασία uoadl:3441043 14 Αναγνώσεις

Μονάδα:
Κατεύθυνση Αναπαραγωγική-Αναγεννητική Ιατρική
Βιβλιοθήκη Επιστημών Υγείας
Ημερομηνία κατάθεσης:
2024-12-03
Έτος εκπόνησης:
2024
Συγγραφέας:
Ξύδη-Χρυσάφη Σταυρούλα
Στοιχεία επιβλεπόντων καθηγητών:
Μαυρογιάννη Δέσποινα, ΕΔΙΠ, Ιατρική Σχολή, ΕΚΠΑ, Επιβλέπουσα
Δρακάκης Πέτρος, Καθηγητής, Ιατρική Σχολή, ΕΚΠΑ
Σταύρος Σοφοκλής, Επίκουρος Καθηγητής, Ιατρική Σχολή, ΕΚΠΑ
Πρωτότυπος Τίτλος:
Σίγαση γονιδίων (RNA silencing) σε αναπαραγωγικό ιστό
Γλώσσες εργασίας:
Ελληνικά
Μεταφρασμένος τίτλος:
Σίγαση γονιδίων (RNA silencing) σε αναπαραγωγικό ιστό
Περίληψη:
Η δειγματοληψία χοριακής λάχνης (CVS) είναι μια διαδικασία προγεννητικού ελέγχου
που περιλαμβάνει την αφαίρεση ενός μικρού δείγματος ιστού του πλακούντα
(χοριακές λάχνες) από τη μήτρα. Αυτή η διαδικασία συνήθως εκτελείται μεταξύ της
10ης και της 13ης εβδομάδας της εγκυμοσύνης και χρησιμοποιείται για τη συλλογή
πληροφοριών σχετικά με τα χρωμοσώματα του μωρού, την ανίχνευση γενετικών
διαταραχών και την αξιολόγηση ορισμένων καταστάσεων. Από ένα δείγμα CVS,
επιλέχθηκε να καλλιεργηθούν τροφοβλαστικά κύτταρα με στόχο την απομόνωση
γενετικού υλικού για ανάλυση γονιδιακής έκφρασης. Τα τροφοβλαστικά κύτταρα
εκφράζουν μια ποικιλία γονιδίων που εμπλέκονται στην εγκατάσταση και τη
διατήρηση της εγκυμοσύνης. Αυτά τα γονίδια συχνά συνδέονται με διεργασίες όπως
η εισβολή στην επένδυση της μήτρας, η ρύθμιση της ανοσολογικής απόκρισης και ο
σχηματισμός του πλακούντα. Τα συγκεκριμένα γονίδια που εκφράζονται μπορεί να
ποικίλλουν ανάλογα με το στάδιο ανάπτυξης των κυττάρων τροφοβλάστης και τις
ειδικές λειτουργίες τους κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης. Η μελέτη αυτών των
γονιδίων είναι σημαντική για την κατανόηση των μοριακών μηχανισμών που διέπουν
την επιτυχημένη εμβρυϊκή ανάπτυξη και την εγκυμοσύνη.
Χρησιμοποιώντας μοριακές τεχνικές, απομονώθηκε γενετικό υλικό από τα
καλλιεργημένα γεννητικά κύτταρα. Στη συνέχεια, ανιχνεύθηκε η έκφραση των
γονιδίων NANOG. Οι μεταλλάξεις ή οι ελλείψεις σε αυτά τα γονίδια σχετίζονται με
παθολογικές καταστάσεις, διαταραχές που σχετίζονται με τη γαμετογένεση και την
υπογονιμότητα.
Με έμφαση στη μελλοντική έρευνα, επιλέχθηκε η χρήση της τεχνικής παρεμβολής
RNA (RNAi) για περαιτέρω διερεύνηση, με στόχο την εφαρμογή αυτής της τεχνικής
στον αναπαραγωγικό ιστό. Η παρεμβολή RNA (RNAi) είναι ένας ρυθμιστικός
μηχανισμός γονιδιακής έκφρασης στον οποίο το RNA καταστέλλει την έκφραση
συμπληρωματικών γονιδίων. Γενετικά, αυτός ο μηχανισμός φαίνεται να προέρχεται
από πρώιμους μηχανισμούς κατά των ιών και παίζει σημαντικό ρόλο στη γενετική
ρύθμιση, την εξελικτική βιολογία και τη διατήρηση του γονιδιώματος. Στα κύτταρα
θηλαστικών, η παρεμβολή RNA εμπλέκεται σε διάφορες βιολογικές λειτουργίες,
συμπεριλαμβανομένης της ρύθμισης των αναπτυξιακών διεργασιών, της κυτταρικής
διαφοροποίησης, της ανοσολογικής απόκρισης και της διατήρησης της σταθερότητας
του γονιδιώματος. Σε αυτή τη διπλωματική χρησιμοποιήσαμε συνθετικά
ολιγονουκλεοτίδια siRNA για γονιδιακή σίγαση τα οποία είναι σχετικά απλά και
γρήγορα στη δημιουργία, σε αντίθεση με τα shRNAs (short hairpin RNAs). Τα shRNA
παραδίδονται στα κύτταρα χρησιμοποιώντας πλασμίδια ή φορείς και αυτός είναι ο
λόγος που προτιμάμε τα siRNA, για να αποφύγουμε τις λοιμώξεις στο εργαστήριο.
Κύρια θεματική κατηγορία:
Επιστήμες Υγείας
Λέξεις-κλειδιά:
Σίγαση γονιδίων, Λήψη χοριακών λαχνών, Πλακουντοποίηση, Μέθοδος παρεμβολής του RNA, Κυτταροκαλλιέργειες
Ευρετήριο:
Όχι
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
0
Εικονογραφημένη:
Ναι
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
59
Αριθμός σελίδων:
62
Xydi Chrysafi_Stavroula_MSc.pdf.pdf (1 MB) Άνοιγμα σε νέο παράθυρο