Μονάδα:
Κατεύθυνση Κλινική ΧημείαΒιβλιοθήκη Σχολής Θετικών Επιστημών
Ημερομηνία κατάθεσης:
2015-10-15
Συγγραφέας:
Αγγελίδης Ηλίας
Στοιχεία επιβλεπόντων καθηγητών:
Ε. Λιανίδου Καθηγήτρια
Πρωτότυπος Τίτλος:
Μελέτη της έκφρασης του υποδοχέα των ανδρογόνων και των εναλλακτικών του μεταγράφων σε κυκλοφορούντα καρκινικά κύτταρα στον καρκίνο του προστάτη
Γλώσσες εργασίας:
Ελληνικά
Μεταφρασμένος τίτλος:
Study of the expression of the androgen receptor and its splice variants in circulating tumor cells in prostate cancer
Περίληψη:
Η μετάσταση οφείλεται στην διασπορά του καρκίνου μέσω των κυκλοφορούντων
καρκινικών κυττάρων (Κυκλοφορούντα Καρκινικά Κύτταρα, CTCs) από τον πρωτογενή
όγκο σε απομακρυσμένα όργανα. Η ανάπτυξη δευτερογενών εστιών, είναι η πιο
επικίνδυνη πλευρά του καρκίνου. Ο μοριακός χαρακτηρισμός των CTCs, μπορεί να
βοηθήσει στην πρόγνωση του καρκίνου, στο σχεδιασμό νέων θεραπευτικών
προσεγγίσεων και στην κατανόηση της βιολογίας της μετάστασης. Επειδή ο αριθμός
των κυττάρων που απομονώνεται από το περιφερικό αίμα των ασθενών είναι
περιορισμένος και η τελική προς ανάλυση ποσότητα του RNA είναι μικρή
απαιτούνται τεχνολογίες με τις οποίες θα είναι εφικτή η ταυτόχρονη ανίχνευση
της έκφρασης πολλών γονιδίων.
Ο καρκίνος του προστάτη τον οποίο μελετά η παρούσα διατριβή είναι η πιο συχνή
κακοήθεια στον ανδρικό πληθυσμό και η δεύτερη κατά σειρά συχνότητας αιτία
θανάτου από καρκίνο στους άνδρες για τον λόγο αυτόν πλήθος βιοδεικτών έχουν
μελετηθεί στα CTCs με σκοπό την αξιολόγηση και τη συσχέτιση των κλινικών
χαρακτηριστικών των ασθενών με καρκίνο του προστάτη, με την κλινική τους
έκβαση. Ένας ιδανικός δείκτης θα πρέπει να είναι ειδικός για τα καρκινικά
κύτταρα και όχι για τα φυσιολογικά κύτταρα, να είναι ειδικός για τον ιστό από
τον οποίο προέρχονται τα συγκεκριμένα καρκινικά κύτταρα. να μην εμφανίζεται σε
οποιοδήποτε άλλο κυτταρικό τύπο του φυσιολογικού ιστού, στον οποίο ανιχνεύονται
τα καρκινικά κύτταρα, καθώς και να ανιχνεύεται εύκολα με μικρή διασπορά και
κλινική συσχέτιση.
Οι στόχοι της παρούσας μελέτης είναι η αξιολόγηση της διαγνωστικής ευαισθησίας
και ειδικότητας τριών διαφορετικών πρωτοκόλλων για τον ποσοτικό προσδιορισμό 6
διαφορετικών γονιδίων της B2M του PCGEM1 καθώς και των AR1, AR3, AR567es και
ARTotal με τη χρήση της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης πραγματικού χρόνου.
Τα τελευταία 4 εναλλακτικά μετάγραφα μελετήθηκαν στη παρούσα διατριβή με την
ανάπτυξη τετραπλής ποσοτικής δοκιμασίας σε πραγματικό χρόνο. Για τον σκοπό
αυτό, πραγματοποιήθηκε in- silico σχεδιασμός των εκκινητών και τεσσάρων
διαφορετικών διπλών ανιχνευτών υβριδοποίησης για τα γονίδια αυτά. Οι ανιχνευτές
αυτοί είναι επισημασμένοι με τέσσερις διαφορετικές χρωστικές των οποίων τα
φάσματα εκπομπής φθορισμού είναι διαφορετικά. Η μέθοδος αναπτύχθηκε στο όργανο
LightCycler 2,0, δεδομένου ότι διαθέτει έξι κανάλια ανίχνευσης.
Οι αναπτυχθείσες μέθοδοι εφαρμόστηκαν σε 16 δείγματα φυσιολογικών αιμοδοτών
και 69 δείγματα ασθενών με καρκίνο του προστάτη στους οποίους απομονώθηκαν τα
CTCs από το περιφερικό αίμα με τη μέθοδο της φικόλης. Στη πλειοψηφία των
περιπτώσεων (>75%) οι ασθενείς ήταν μεταστατικοί. Πάνω από το 30% των ασθενών
εμφανίζουν κάποιο από τα εναλλακτικά μετάγραφα γεγονός που τοποθετεί για άλλη
μια φορά τον υποδοχέα ανδρογόνων στο επίκεντρο της έρευνας πάνω στην κακοήθεια
του προστάτη.
Λέξεις-κλειδιά:
B2M, PCGEM1, AR Splice Variants, multiplex-PCR, CTCs
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
1-10
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
175
Αρχείο:
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο.
document.pdf
4 MB
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο.
