Μονάδα:
Κατεύθυνση Χημική Ανάλυση-Έλεγχος ΠοιότηταςΒιβλιοθήκη Σχολής Θετικών Επιστημών
Ημερομηνία κατάθεσης:
2020-02-13
Συγγραφέας:
Κούτρας Νικόλαος
Στοιχεία επιβλεπόντων καθηγητών:
Μαρκοπούλου Αικατερίνη, Αναπληρώτρια Καθηγήτρια, Εργαστήριο Φαρμακευτικής Ανάλυσης, Τμήμα Φαρμακευτικής, Αριστοτέλειο Πανεπιστήμιο Θεσσαλονίκης
Πρωτότυπος Τίτλος:
Ανάπτυξη μεθόδου προσδιορισμού υδροκορτιζόνης σε πλάσμα αίματος με εφαρμογή υγρής χρωματογραφίας συζευγμένης με φασματομετρία μάζας
Γλώσσες εργασίας:
Ελληνικά
Μεταφρασμένος τίτλος:
Ανάπτυξη μεθόδου προσδιορισμού υδροκορτιζόνης σε πλάσμα αίματος με εφαρμογή υγρής χρωματογραφίας συζευγμένης με φασματομετρία μάζας
Περίληψη:
Στην παρούσα εργασία αναπτύχθηκε μια γρήγορη, αξιόπιστη και ευαίσθητη μέθοδος υγρής χρωματογραφίας συζευγμένη με φασματομετρία μάζας (LC-MS) για τον ποσοτικό προσδιορισμό ελεύθερης κορτιζόλης σε πλάσμα αίματος.
Η οξική πρεδνιζολόνη χρησιμοποιήθηκε ως εσωτερικό πρότυπο. Ο καθαρισμός των δειγμάτων πραγματοποιήθηκε με την τεχνική εκχύλισης στερεάς φάσης (SPE). Το εκχύλισμα αναλύθηκε με φασματομετρία μάζας ηλεκτροψεκασμού με πηγή τετράπολο (ESI-Q), με τη μέθοδο προσθήκης αρνητικού ιόντος (m/z=397 για την κορτιζόλη και m/z=437 για την οξική πρεδνιζολόνη). Οι χρωματογραφικές συνθήκες περιλάμβαναν στήλη αντιστρόφου φάσεως (C18) και ισοκρατική έκλουση (ροή 0,5mL/min, ACN:H2O 50:50 v/v). Για την ανάπτυξη της μεθόδου, ετοιμάστηκαν τρεις σειρές προτύπων διαλυμάτων: Α. πρότυπα καθαρά, Β. πρότυπα που υποβλήθηκαν σε SPE και Γ. πρότυπα που παρασκευάστηκαν με εμβολιασμό ορού αίματος, και αφού μετρήθηκαν στο LC/MS, κατασκευάστηκαν οι αντίστοιχες καμπύλες αναφοράς με τη μέθοδο των ελαχίστων τετραγώνων.
Οι ανακτήσεις της κορτιζόλης κυμαίνονταν από 91,9% έως 111,5%, και οι σχετικές τυπικές αποκλίσεις %RSD μεταξύ 6,0% και 15,2%. Το όριο ανίχνευσης για την κορτιζόλη ήταν 0,85ng/mL και το όριο ποσοτικοποίησης 2,81ng/mL. Η αναλυτική μέθοδος επέδειξε καλή γραμμικότητα σε συγκεντρώσεις από 10,8 έως 345,6ng/mL. Ο συντελεστής συσχέτισης (r2) ήταν μεγαλύτερος από 0,9981.
Κύρια θεματική κατηγορία:
Θετικές Επιστήμες
Λέξεις-κλειδιά:
κορτιζόλη, οξική πρεδνιζολόνη, πλάσμα αίματος, SPE, LC-MS
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
3
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
78
