Μελέτη της αποσιώπησης των εξωνίων 5 και 6 του ανθρώπινου γονιδίου IGF-1 σε ανθρώπινες κυτταρικές σειρές

Διδακτορική Διατριβή uoadl:1307152 185 Αναγνώσεις

Μονάδα:
Τομέας Βασικών Επιστημών
Βιβλιοθήκη Επιστημών Υγείας
Ημερομηνία κατάθεσης:
2016-01-11
Έτος εκπόνησης:
2016
Συγγραφέας:
Δημακάκος Ανδρέας
Στοιχεία επταμελούς επιτροπής:
Αναπληρώτρια καθηγήτρια Παναγούλα Αγγελογιάννη
Πρωτότυπος Τίτλος:
Μελέτη της αποσιώπησης των εξωνίων 5 και 6 του ανθρώπινου γονιδίου IGF-1 σε ανθρώπινες κυτταρικές σειρές
Γλώσσες διατριβής:
Ελληνικά
Περίληψη:
Σκοπός: Να διερευνηθεί εάν τα πεπτίδια Ea, Eb, Ec του παράγοντα IGF-1,
διαθέτουν βιολογική σημασία για το κύτταρο πέρα από τον ώριμο IGF-1, ο οποίος
μέχρι τώρα θεωρείται το βασικό βιολογικά ενεργό μόριο. Για το σκοπό αυτό
σχεδιάστηκε μεθοδολογία προς απενεργοποίηση των εξωνίων 5 και 6 του γονιδίου
του IGF-1, η οποία θα οδηγήσει σε παύση της παραγωγής των τριών πεπτιδίων,
αφήνοντας τον ώριμο IGF-1 ανέπαφο.
Μεθοδολογία: Κατασκευάστηκε πλασμιδιακός φορέας, ο οποίος μέσω ομόλογου
ανασυνδυασμού θα αντικαταστήσει το εξώνιο 5 με αντιβιοτική αλληλουχία και θα
εισάγει κωδικόνια λήξης σε όλα τα πλαίσια ανάγνωσης πριν το εξώνιο 6. Ο φορέας
εισάχθηκε σε καρκινικά κύτταρα προστάτη PC-3, και στη συνέχεια πραγματοποιήθηκε
χαρακτηρισμός της νέας κυτταρικής σειράς και εμβάθυνση σε χαρακτηριστικά τους,
τα οποία διαφέρουν από τα φυσιολογικά PC-3 κύτταρα.
Αποτελέσματα: Τα PC-3 κύτταρα στα οποία εισάχθηκε ο πλασμιδιακός φορέας (EDOKO
PC-3 κύτταρα) παρουσίασαν μειωμένη κινητικότητα, ρυθμό πολλαπλασιασμού, και
αυξημένο μέγεθος. Επίσης παρουσίασαν άρση του κυτταρικού κύκλου στη φάση G2/M,
ολική απώλεια του παράγοντα cdc25b και πρόωρη κυτταρική γήρανση. Όταν τα EDOKO
PC-3 κύτταρα εισάχθηκαν υποδορίως όμως σε SCID ποντίκια για διάστημα 5
εβδομάδων, παρουσίασαν μεγαλύτερη ογκοπαραγωγική ικανότητα από τα MOCK PC-3
κύτταρα, στα οποία είχε εισαχθεί μη τροποποιημένος πλασμιδιακός φορέας ως
μάρτυρας.
Λέξεις-κλειδιά:
Αποσιώπηση, Ινσουλίνο-μιμητικοί αυξητικοί παράγοντες , Καρκίνος προστάτη, Παύση κυτταρικού κύκλου, Πρόωρη κυτταρική γήρανση
Ευρετήριο:
Όχι
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
0
Εικονογραφημένη:
Ναι
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
164
Αριθμός σελίδων:
142
Αρχείο:
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο.

document.pdf
4 MB
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο.