Μονάδα:
Τομέας Βιοχημείας Μοριακής ΒιολογίαςΒιβλιοθήκη Σχολής Θετικών Επιστημών
Ημερομηνία κατάθεσης:
2014-12-16
Συγγραφέας:
Τσατσαρούνος Σωτήρης
Στοιχεία επταμελούς επιτροπής:
Λεκανίδου Ρένα Ομότιμη Καθηγήτρια ΕΚΠΑ (επιβλέπουσα), Ροδάκης Γεώργιος Καθηγητής ΕΚΠΑ, Swevers Luc Ερευνητής Α’, ΕΚΕΦΕ «Δημόκριτος»
Πρωτότυπος Τίτλος:
Μοριακή ανάλυση της διαφορικής έκφρασης γονιδίων σε λεπιδόπτερα έντομα: Μελέτη της "αρχιτεκτονικής" του υποκινητή του γονιδιακού ζεύγους Α/Β.L9 στο μεταξοσκώληκα bombyx mori μέσω ηλεκτροδιάτρησης
Γλώσσες διατριβής:
Ελληνικά
Μεταφρασμένος τίτλος:
Molecular analysis of differential gene expression in Lepidoptera insects:“Architecture” analysis of the A/B.L9 gene pair promoter in the silkmoth Bombyx mori via electroporation
Περίληψη:
Η μελέτη των μοριακών μηχανισμών, που εμπλέκονται στη διαφορική γονιδιακή
έκφραση, προϋποθέτει τη χρήση κατάλληλων συστημάτων-μοντέλων όπως το σύστημα
της χοριογένεσης (σχηματισμός κελύφους του αυγού) στο μεταξοσκώληκα Bombyx
mori.
Σκοπό της διατριβής αποτέλεσε η μελέτη της «αρχιτεκτονικής» των υποκινητών,
δηλαδή πώς συνδράμουν στην αναπτυξιακή εξειδίκευση της έκφρασης των γονιδίων
του χορίου η τοπολογία, ο αριθμός και ο προσανατολισμός συγκεκριμένων θέσεων
πρόσδεσης μεταγραφικών παραγόντων–θ.π.μ.π (C/EBP, GATA, HMGA, CHD1). Ως βασική
μέθοδο προσέγγισης, επιλέξαμε την τεχνική της ηλεκτροδιάτρησης για την εισαγωγή
και έκφραση γονιδιακών κατασκευών, μεταλλαγμένων σε διάφορες θ.π.μ.π., στα
επιθηλιακά κύτταρα των ωοθυλακίων του μεταξοσκώληκα.
Αρχικά, πραγματοποιήθηκε βελτιστοποίηση των παραμέτρων ηλεκτροδιάτρησης: ένταση
ηλεκτρικού πεδίου 250Volt/cm, συνολική διάρκεια παλμών 25msec - (2–3) παλμοί
και διάλυμα ηλεκτροδιάτρησης για κυτταροκαλλιέργειες ως μέσο στο οποίο
εφαρμόζεται το ηλεκτρικό ρεύμα. Έπειτα, επιβεβαιώθηκε ότι οι παραπάνω συνθήκες
δεν επηρεάζουν το αναπτυξιακό πρόγραμμα της χοριογένεσης των ωοθυλακίων καθώς
αναπτύσσονται σε in vitro καλλιέργειες. Τέλος, μελετήθηκε η «αρχιτεκτονική» του
«διφασικού» υποκινητή του γονιδιακού ζεύγους Α/Β.L9 με αποτέλεσμα να προκύψει
ένα αναθεωρημένο πρότυπο για τη σωστή αναπτυξιακή ρύθμιση της μεταγραφής (προς
οποιαδήποτε κατεύθυνση) που περιλαμβάνει ένα αυστηρό πρόγραμμα πρόσδεσης -των
προαναφερθέντων- μεταγραφικών παραγόντων σε συγκεκριμένα cis-ρυθμιστικά
στοιχεία, των οποίων η προσβασιμότητα εξαρτάται από δύο νουκλεοσώματα, παρόντα
στον υποκινητή.
Λέξεις-κλειδιά:
Γονιδιακή έκφραση, Διφασικοί υποκινητές, Χοριογένεση, Ηλεκτροδιάτρηση, Bombyx mori
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
0
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
152
Αρχείο:
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο.
document.pdf
4 MB
Δεν επιτρέπεται η πρόσβαση στο αρχείο.
