Effect of continuous hydrostatic pressure on chondrocyte differentiation

Διπλωματική Εργασία uoadl:1315390 655 Αναγνώσεις

Μονάδα:
Κατεύθυνση Ορθοδοντική (Κλινικές Ειδικεύσεις)
Βιβλιοθήκη Οδοντιατρικής
Ημερομηνία κατάθεσης:
2016-03-24
Έτος εκπόνησης:
2016
Συγγραφέας:
Καραμεσίνης Κωνσταντίνος
Στοιχεία επιβλεπόντων καθηγητών:
Επίκουρος Καθηγητής κ. Ηλίας Μπιτσάνης, Επίκουρη Καθηγήτρια κ. Ελένη Βασταρδή, Αναπληρώτρια Καθηγήτρια κ. Ευθυμία Μπάσδρα
Πρωτότυπος Τίτλος:
Effect of continuous hydrostatic pressure on chondrocyte differentiation
Γλώσσες εργασίας:
Αγγλικά
Μεταφρασμένος τίτλος:
Η επίδραση της συνεχούς υδροστατικής πίεσης στη διαφοροποίηση των χονδροκυττάρων
Περίληψη:
Παρά το γεγονός ότι οι μηχανικές δυνάμεις επάγουν τη χονδρογένεση και
επηρεάζουν τη διαφοροποίηση και την ωρίμανση των χονδροκυττάρων in vitro, η
αλληλουχία των βιοχημικών γεγονότων που ακολουθεί την άσκηση συνεχών δυνάμεων
στα χονδροκύτταρα παραμένει αδιευκρίνιστη.
Σκοπός: Να διερευνηθεί η μακροπρόθεσμη επίδραση της υδροστατικής πίεσης στη
διαφοροποίηση των χονδροκυττάρων, όπως αντικατοπτρίζεται στα πρωτεϊνικά επίπεδα
των μεταγραφικών παραγόντων SOX9 και RUNX2. Επίσης, να μελετηθεί η μεταγραφική
δραστηριότητα του SOX9, προσδιοριζόμενη από τα επίπεδα φωσφορυλίωσής του
(pSOX9).
Υλικά και Μέθοδος: 14,7kPa συνεχούς υδροστατικής πίεσης ασκήθηκαν σε ATDC5
χονδροκύτταρα για 12, 24, 48 και 96 ώρες υπό συνθήκες καλλιέργειας σε απλό
θρεπτικό υλικό ή σε θρεπτικό υλικό διαφοροποίησης που περιείχε ινσουλίνη (ITS).
Καλλιέργειες ATDC5 κυττάρων σε ITS θρεπτικό υλικό για τα ίδια χρονικά
διαστήματα αποτέλεσαν ομάδες ελέγχου. Σε κάθε χρονικό σημείο του εκάστοτε
πειράματος λήφθηκαν πρωτεϊνικά εκχυλίσματα και ακολούθησε ανοσοαποτύπωση κατά
Western για την αξιολόγηση των επιπέδων των πρωτεϊνών SOX9, pSOX9 και RUNX2.
Αποτελέσματα: Παρατηρήθηκε μείωση στα επίπεδα των πρωτεϊνών SOX9 και pSOX9 μετά
από άσκηση υδροστατικής πίεσης στα ATDC5 κύτταρα για χρονικό διάστημα 12 ωρών.
Ακολούθως, από το χρονικό σημείο των 24 ωρών και έπειτα, τα πρωτεϊνικά τους
επίπεδα σημείωσαν αύξηση. Αντίστροφο πρότυπο παρατηρήθηκε για το μεταγραφικό
παράγοντα RUNX2, η έκφραση του οποίου έφτασε στο μέγιστο επίπεδο μετά από 24
ώρες πίεσης και καλλιέργειας σε ITS θρεπτικό υλικό. Τα χρονικά σημεία των 12
και 24 ωρών θεωρούνται κρίσιμα για τη μετάβαση των χονδροκυττάρων προς τα όψιμα
στάδια διαφοροποίησης κατά την άσκηση υδροστατικής πίεσης σε συνθήκες
καλλιέργειας με απλό θρεπτικό υλικό και με ITS θρεπτικό υλικό, αντίστοιχα.
Συμπεράσματα: Τα αποτελέσματα της έρευνας αυτής παρέχουν ενδείξεις ότι η
συνεχής υδροστατική πίεση επάγει τη διαφοροποίηση των χονδροκυττάρων μέσω μιας
σειράς γεγονότων που σε μοριακό επίπεδο περιλαμβάνουν μεταβολές στους
μεταγραφικούς παράγοντες SOX9 και RUNX2. Επίσης, προτείνεται ένα θεωρητικό
υπόβαθρο για το μηχανισμό δράσης των λειτουργικών μηχανημάτων στην κλινική
πράξη.
Λέξεις-κλειδιά:
Χονδροκύτταρα, Διαφοροποίηση, Υδροστατική πίεση, Sox9
Ευρετήριο:
Όχι
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
0
Εικονογραφημένη:
Ναι
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
67
Αριθμός σελίδων:
52