Μονάδα:
Τμήμα ΧημείαςΒιβλιοθήκη Σχολής Θετικών Επιστημών
Ημερομηνία κατάθεσης:
2017-07-09
Συγγραφέας:
Κιούση Μαρούλα
Στοιχεία επταμελούς επιτροπής:
Μιχαήλ Κουππάρης, Καθηγητής Τμήματος Χημείας, ΕΚΠΑ
Νικόλαος Θωμαΐδης, Αναπληρωτής Καθηγητής Τμήματος Χημείας, ΕΚΠΑ
Ευάγγελος Μπακέας, Αναπληρωτής Καθηγητής Τμήματος Χημείας, ΕΚΠΑ
Αντώνιος Καλοκαιρινός, Καθηγητής Τμήματος Χημείας, ΕΚΠΑ
Αναστάσιος Οικονόμου, Αναπληρωτής Καθηγητής Τμήματος Χημείας, ΕΚΠΑ
Ευάγγελος Γκίκας, Επίκουρος Καθηγητής Τμήματος Φαρμακευτικής, ΕΚΠΑ
Ιωάννης Ντότσικας, Επίκουρος Καθηγητής Τμήματος Φαρμακευτικής, ΕΚΠΑ
Πρωτότυπος Τίτλος:
Ανάπτυξη μεθόδων ανίχνευσης απαγορευμένων ουσιών σε ούρα αλόγων
Γλώσσες διατριβής:
Ελληνικά
Μεταφρασμένος τίτλος:
Ανάπτυξη μεθόδων ανίχνευσης απαγορευμένων ουσιών σε ούρα αλόγων
Περίληψη:
Στην παρούσα διδακτορική διατριβή αναπτύσσεται μια γενικευμένη μέθοδος σάρωσης για τον ποιοτικό προσδιορισμό της ταυτότητας απαγορευμένων ουσιών και μεταβολιτών αυτών, με σκοπό τον έλεγχο ντόπινγκ στα ιππικά αθλήματα. Αυτή βασίζεται στο σχεδιασμό μιας ενοποιημένης παρασκευαστικής πορείας και στη συνδυασμένη εφαρμογή υγρο- και αεριοχρωματογραφίας – φασματομετρίας μαζών για την ανάλυση των προκατεργασμένων δειγμάτων ούρων αλόγων. Η προετοιμασία των δειγμάτων αρχίζει με δύο παράλληλα στάδια: ενζυμική υδρόλυση των εστέρων του γλυκουρονικού και του θειικού οξέος, και χημική υδρόλυση (μεθανόλυση), κυρίως, για τους 17β-θειικούς εστέρες των αναβολικών στεροειδών. Τα εκχυλίσματα επεξεργάζονται, καταλλήλως, για αναλύσεις LC-TOF-MS, GC-MS και GC-HRMS. Η πλειοψηφία των εξεταζόμενων ουσιών ανιχνεύονται χωρίς παραγωγοποίηση, μέσω της τεχνικής LC-TOF-MS, η οποία εμφανίζει την ικανότητα μέτρησης ακριβούς μάζας. Η προετοιμασία των δειγμάτων περιλαμβάνει σχηματισμό μεθυλο- και TMS-παραγώγων, τα οποία είναι πολύ διαδεδομένα στις τοξικολογικές βιβλιοθήκες GC-MS. Η μέθοδος σάρωσης ενισχύεται με την αναζήτηση απαγορευμένων ουσιών σε βιβλιοθήκες φασμάτων μαζών, χρησιμοποιώντας προγράμματα φασματικής αποσυνέλιξης, AMDIS και DRS. Η εν λόγω μεθοδολογία εμφανίζει την ικανότητα ταυτοποίησης περισσότερων των τριακοσίων πενήντα απαγορευμένων ουσιών σε ούρα αλόγων κι επιπλέον, μπορεί να ενσωματώσει νέες ουσίες, χωρίς αλλαγές στη χρωματογραφία. Επίσης, η ανάλυση σε λειτουργία πλήρους σάρωσης (LC-TOF-MS, GC-MS), επιτρέπει την αναδρομική εξέταση παλαιών δειγμάτων με επεξεργασία των δεδομένων που είχαν ληφθεί. Η επικύρωση πραγματοποιείται για εξήντα ουσίες και περιλαμβάνει προσδιορισμό ορίου ανίχνευσης, ανάκτησης από εκχύλιση, επίδρασης του υποστρώματος, επιμόλυνσης από προηγούμενο δείγμα, όπως επίσης, έλεγχο των παρεμποδίσεων από το υπόστρωμα και της ικανότητας μέτρησης ακριβούς μάζας. Η καταλληλότητα της μεθοδολογίας αποδείχτηκε και με την εφαρμογή αυτής σε αυθεντικά θετικά δείγματα ούρων, όπως επίσης και στα δείγματα του «Proficiency Test» του AORC του 2012.
Κύρια θεματική κατηγορία:
Θετικές Επιστήμες
Λοιπές θεματικές κατηγορίες:
Αναλυτική χημεία
Λέξεις-κλειδιά:
Έλεγχος ντόπινγκ, ούρα αλόγων, μέθοδος σάρωσης, φασματομετρία μαζών, φασματική αποσυνέλιξη
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
0
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
179
