Μονάδα:
Τμήμα ΙατρικήςΒιβλιοθήκη Επιστημών Υγείας
Ημερομηνία κατάθεσης:
2024-09-06
Συγγραφέας:
Μαυρέλη Δανάη
Στοιχεία επταμελούς επιτροπής:
Ιωάννα Ραχήλ Συνοδινού Traeger, Καθηγήτρια, Ιατρική Σχολή, ΕΚΠΑ
Γεώργιος Δασκαλάκης, Καθηγητής, Ιατρική Σχολή, ΕΚΠΑ
Καλλιόπη Παππά, Καθηγήτρια, Ιατρική Σχολή, ΕΚΠΑ
Μακάριος Ελευθεριάδης, Επίκουρος Καθηγητή, Ιατρική Σχολή, ΕΚΠΑ
Μαριάννα Θεοδώρα, Επίκουρη Καθηγήτρια, Ιατρική Σχολή, ΕΚΠΑ
Παναγιώτης Αντσακλής, Επίκουρος Καθηγητής, Ιατρική Σχολή, ΕΚΠΑ
Χρυσταλέννα Σοφοκλέους, Επίκουρη Καθηγήτρια, Ιατρική Σχολή, ΕΚΠΑ
Πρωτότυπος Τίτλος:
Πρωτεωμικοί δείκτες πρώιμης ανίχνευσης εγκύων υψηλού κινδύνου για πρόωρο τοκετό
Γλώσσες διατριβής:
Ελληνικά
Μεταφρασμένος τίτλος:
Πρωτεωμικοί δείκτες πρώιμης ανίχνευσης εγκύων υψηλού κινδύνου για πρόωρο τοκετό
Περίληψη:
Σκοπός: Σκοπός της µελέτης είναι η ταυτοποίηση πρωτεϊνών που σχετίζονται µε την πρώιμη πρόβλεψη και τον παθογενετικό µηχανισµό του πρόωρου τοκετού µε μελέτη της έκφρασης τους στο περιφερικό αίμα εγκύων, το πρώτο τρίµηνο της κύησης, που αργότερα διεκπεραίωσαν τον τοκετό πρόωρα, μεταξύ 320/7και 366/7 εβδομάδων κύησης σε σχέση µε εγκύους µε τελειόμηνη κύηση
Βιολογικό υλικό & Μεθοδολογίες: Κατά το πρώτο στάδιο της μελέτης, το διερευνητικό, έγινε ανάλυση της πρωτεϊνικής έκφρασης με μεθόδους πρωτεωμικής, με υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (ΗPLC), σε συνδυασμό με διαδοχική φασματογραφία μάζας (MS/MS) και επισήμανση των πρωτεϊνών με αντιδραστήρια iTRAQ, σε δείγματα πλάσματος από 5 εγκύους με πρόωρο τοκετό και 5 µε τελειόμηνες κυήσεις (οµάδα ελέγχου). Ακολούθησε ανάλυση των πρωτεϊνών με διαφοροποημένη έκφραση µεταξύ των δύο οµάδων µε μεθόδους βιοπληροφορικής, για την ταυτοποίηση των ρυθμιστικών οδών στις οποίες συµµετέχουν και την ανάλυση Γονιδιακής Οντολογίας (Gene Ontology) (βιολογική διαδικασία, µοριακή λειτουργία και κυτταρική σύσταση).
Κατά το δεύτερο στάδιο της μελέτης, το στάδιο της επιβεβαίωσης, επικυρώθηκε η διαφορετική έκφραση πρωτεϊνών που εντοπίστηκαν κατά το διερευνητικό στάδιο με στοχευμένη ποσοτικοποίηση επιλεγμένων πρωτεïνών με ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA) σε 58 δείγματα περιφερικού αίματος, 29 από εγκύους που στη συνέχεια διεκπεραίωσαν την κύηση με αυτόματο πρόωρο τοκετό μεταξύ 320/7 και 366/7 εβδομάδων και 29 από εγκύους χωρίς την επιπλοκή.
Αποτελέσµατα: Συγκριτική ανάλυση της πρωτεϊνικής έκφρασης οδήγησε στη ταυτοποίηση 142 πρωτεϊνών με διαφοποποιημένη έκφραση μεταξύ των δύο ομάδων από τις οποίες 54 παρουσίαζαν αυξημένη έκφραση σε εγκύους που τελικά γέννησαν με αυτόματο πρόωρο τοκετό στις 320/7 και 366/7 εβδομάδες κύησης σε σχέση με την ομάδα ελέγχου (λόγος ιόντων αναφοράς >1.5) και 88 με μειωμένη έκφραση (λόγος ιόντων αναφοράς <0.5). Δεν ανιχνεύτηκαν πρωτεΐνες με διαφοροποιημένη έκφραση μεταξύ των δύο ομάδων που να πληρούν τις προϋποθέσεις στατιστικής σημαντικότητας(p<0.05). In silico ανάλυση έδειξε ότι οι πρωτεΐνες με διαφοροποιημένη έκφραση στο πλάσμα εγκύων με αυτόματο πρόωρο τοκετό εμπλουτίζονται κυρίως στην ρυθμιστική οδό της πήξης και στην οδό του συμπληρώματος και επιβεβαιώνουν την εμπλοκή του αιμοστατικού συστήματος και την ενεργοποίηση του συμπληρώματος στον παθογενετικό μηχανισμό που οδηγεί στην εμφάνιση της επιπλοκής Κατά το δεύτερο στάδιο της μελέτης για περεταίρω επιβεβαίωση επιλέχθηκαν τρείς πρωτεΐνες οι VCAM-1, SAA και Talin-1, με την πλέον σημαντική τιμή p (μικρότερη τιμή p). Η ανάλυση επιβεβαίωσε τα ευρήματα της πρωτεωμικής ανάλυσης και αποκάλυψε μειωμένα επίπεδα των πρωτεϊνών VCAM-1, SAA και Talin-1 στο πλάσμα εγκύων, το πρώτο τρίμηνο της κύησης, που εμφάνισαν στη συνέχεια αυτόματο προώρο τοκετό. Στατιστική ανάλυση έδειξε τη δυνατότητα να διακρίνουν τις εγκύους υψηλού κινδύνου για αυτόματο πρόωρο τοκετό από εκείνες που με AUC>0,8 και p<0,05. Σύμφωνα με το μοντέλο πολυμεταβλητής παλινδρόμησης, οι πρωτεΐνες VCAM 1 (p=0,001) και Talin -1 (p<0,001) μπορούν να προβλέψουν με ακρίβεια τον επακόλουθο αυτόματο πρόωρο τοκετό ανεξάρτητα από τους παράγοντες που μελετήθηκαν (ατομικό ιστορικό αυτόματου πρόωρου τοκετού,, κάπνισμα, BMI πριν από την εγκυμοσύνη, ηλικία εγκύου, φύλο εμβρύου και τρόπος σύλληψης)
Συµπεράσµατα:Στη παρούσα μελέτη η χρησιμοποίηση της τεχνολογίας της πρωτεωμικής για τη μελέτη της πρωτεινικής έκφρασης στο περιφερικό αίμα εγκύων, στο πρώτο τρίμηνο της κύησης οδήγησε στη ταυτοποίηση των πρωτεινών Talin-1 και VCAM-1, ως υποψήφιους βιοδείκτες που συνδέονται στενά με τον κίνδυνο εμφάνισης αυτόματου πρόωρου τοκετού.
Οι βιοδείκτες αυτοί, μετά από αξιολόγηση σε ευρείας κλίµακας µελέτες, μπορούν να διευκολύνουν την κατανόηση του παθοφυσιολογικού μηχανισμού της επιπλοκής και να συμβάλλουν στην ανάπτυξη εξειδικευμένων και χαμηλού κόστους προβλεπτικών δοκιμασιών που θα αλλάξουν ριζικά τον τρόπο διαχείρισης της κύησης. Αποτελούν επιπλέον πιθανούς θεραπευτικούς στόχους.
Κύρια θεματική κατηγορία:
Επιστήμες Υγείας
Λέξεις-κλειδιά:
Επιπλοκές κύησης, Πρόωρος τοκετός, Πρωτεωμική, Βιοδείκτες
Αρ. σελίδων ευρετηρίου:
0
Αρ. βιβλιογραφικών αναφορών:
364
